本文作者：劉小可 李俐 閆宏 單位：寧夏大學農(nóng)學院

在屠宰前，使用注射器對全部試驗肉牛進行尾靜脈采血，置于１０ｍＬ不加抗凝劑的離心管中，用記號筆在離心管上記錄牛耳號，迅速置于放有冰袋的采樣箱中。利用高速離心機以３０００ｒ／ｍｉｎ離心１０ｍｉｎ，分離血清，將血清置于－２０℃冰箱冷凍保存待測。使用雷杜ＲＴ－２００ＣＰｌｕｓ全自動生化分析儀測定結(jié)石組血清的鉀（Ｋ）、鈉（Ｎａ）、氯（Ｃｌ）、鈣（Ｃａ）、磷（Ｐ）和鎂（Ｍｇ）。１．２．４結(jié)石的化學成分分析取屠宰后腎結(jié)石樣品，將結(jié)石樣品噴鉑金后，在ＥＤＡＸ－Ｇｅｎｅｓｉｓ２０００型Ｘ－射線能譜儀上分析其各元素的含量。１．２．５數(shù)據(jù)處理所有的數(shù)據(jù)使用Ｅｘｃｅｌ２００７進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析，結(jié)果用平均值±標準差的形式表示。

在４０頭肉牛的屠宰過程中，共發(fā)現(xiàn)２３頭患有腎結(jié)石的肉牛，發(fā)病率為５７．５％。牛腎為典型的多乳頭腎，經(jīng)剖檢可知，結(jié)石大多聚集在個別腎乳頭內(nèi)部的腎盂處。腎結(jié)石大部分呈現(xiàn)乳白色或淡黃色，其中大多數(shù)呈細小的砂粒狀結(jié)石。有結(jié)石的腎乳頭主要集中在牛腎的兩個尖端處，而中間部分的腎乳頭幾乎不存在結(jié)石。每頭牛每天采食１０ｋｇ的精料和２ｋｇ的稻草，計算出每日的干物質(zhì)采食量（ＤＭＩ）、粗蛋白質(zhì)（ＣＰ）、鈣（Ｃａ）和磷（Ｐ）的攝入量，并且和肉牛飼養(yǎng)標準進行比較。該肉牛場的干物質(zhì)采食量（ＤＭＩ）略高于營養(yǎng)標準。每日飼料蛋白質(zhì)的攝入量偏高，鈣和磷的攝入量過高，且飼料的鈣磷比嚴重失衡，磷的含量比鈣高。血液生化指標的測定使用雷杜ＲＴ－２００ＣＰｌｕｓ全自動生化分析儀測定結(jié)石組的血清生化指標，并且將結(jié)果與正常肉牛的參考值（王書林，２００１）進行對比。結(jié)石組的血清鈣（Ｃａ）明顯下降，而血清磷（Ｐ）和血清鎂（Ｍｇ）明顯上升，其他離子指標都處于正常的參數(shù)范圍內(nèi)。結(jié)合表２可知，高磷低鈣飼料和血液生化指標的高磷低鈣之間存在著相關(guān)性。２．４結(jié)石能譜分析結(jié)果使用Ｘ－射線能譜儀測定腎結(jié)石的化學成分結(jié)果結(jié)石的主要化學成分為磷和鎂，同時還含有少量的氮和鉀。從化學成分分析，初步判斷該結(jié)石的主要成分是磷酸鎂銨和磷酸鎂鉀的混合物。

長期以來，精粗比過高一直被普遍認為是腎結(jié)石的重要誘因之一。Ｍｕｎａｋａｔａ等（１９７４）研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當精料的飼喂量達到閹牛體重的１．５％時，尿液中就可以檢測到尿沉渣晶體；而當精料的飼喂量占體重的２．５％時，飼喂２個月以上尿中就可以檢測到大量尿沉渣，并開始形成結(jié)石。該牛場體重為５００ｋｇ左右的長期育肥閹牛每日精料采食量為１０ｋｇ，占體重的２％。在該精料比例下，可以緩慢沉積尿沉渣；當尿液中的尿沉渣數(shù)量累積到某個閾值時，就會形成結(jié)石。此外，育肥時間跟結(jié)石的形成也可能有很大關(guān)系，該牛場因生產(chǎn)高檔牛肉而采取長期育肥方式，有利于尿沉渣的累積，也有可能是結(jié)石產(chǎn)生的促進因素。人們普遍認為尿石癥是家畜體內(nèi)礦物質(zhì)代謝紊亂的結(jié)果，其中飼料的鈣磷比是學者研究的熱點。飼料中合理的鈣磷比在１．５～２．１之間，這時的鈣和磷均容易被動物體吸收。該肉牛場飼料的鈣磷比僅為０．９４，遠遠低于上述比例，出現(xiàn)了磷含量高于鈣的現(xiàn)象。據(jù)報道，當飼喂大量玉米、麩皮等飼料，鈣磷比在１左右時，就會在尿道內(nèi)形成磷酸鎂銨結(jié)石。同時，飼料的高磷低鈣，會導致進入血液中無機磷的增加，導致血清和尿液的高磷，提高腎結(jié)石的發(fā)病率（張高軒等，１９８９）。

飼料離子對結(jié)石鹽結(jié)晶成核的影響牛羊的結(jié)石大多數(shù)屬于碳酸鈣和磷酸鎂銨，而在高磷低鈣日糧中則以磷酸鎂銨結(jié)石為主。由結(jié)石的能譜分析結(jié)果可知，尿結(jié)石的主要化學成分是鎂和磷，主要成分是磷酸鎂銨和磷酸鎂鉀。在尿液的過飽和結(jié)晶學說體系中，尿液是體內(nèi)的一種膠體溶液。離子積是溶液中某溶質(zhì)各離子濃度的乘積，當該離子積超過溶度積，溶質(zhì)就會結(jié)晶析出，再經(jīng)歷成核、聚集及固相轉(zhuǎn)化等一系列物理化學變化形成結(jié)石（Ｍｃｇａｖｉｎ等，２００７）。以磷酸鎂銨結(jié)石為例，磷酸鎂銨結(jié)石的形成必然與尿液中的磷、鎂和氨離子濃度密不可分。只有當磷酸鎂銨的離子積超過其溶度積，才可能發(fā)生過飽和，從而析出結(jié)晶。在本試驗中，血清中的磷和鎂偏高，這與日糧中的高磷和高鎂有關(guān)；而高磷高鎂的日糧會導致通過尿路排放的磷和鎂含量大大增加。該牛場的飼料屬于高蛋白質(zhì)日糧，過量的蛋白質(zhì)在體內(nèi)分解代謝產(chǎn)生多余的氨也要進入尿路排泄。當尿路中大量的磷、鎂和氨在尿液中聚集時，磷酸鎂銨的離子積就會超過其溶度積，造成磷酸鎂銨溶液的過飽和，從而析出晶體，形成磷酸鎂銨的尿沉渣，該尿沉渣的長期積累就可能會形成磷酸鎂銨結(jié)石。

鎂離子對結(jié)石抑制因子Ｔａｍｍ－Ｈｏｒｓｆａｌｌ蛋白的調(diào)節(jié)作用結(jié)石抑制因子可以維持尿液的過飽和狀態(tài)而無法持續(xù)析出結(jié)晶，從而抑制尿石產(chǎn)生的結(jié)晶動力學過程。在正常的尿液中，存在著一類結(jié)石抑制因子Ｔａｍｍ－Ｈｏｒｓｆａｌｌ蛋白（ＴＨ蛋白）。ＴＨ蛋白具有特殊的結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)；當它以單體形式存在吸附在晶體表面時，對晶體的生長和聚集均具有較強的抑制作用；但是當ＴＨ蛋白自身聚合變性成凝膠狀時，它的黏度會增加，從而減弱或失去其抑制作用，甚至轉(zhuǎn)為促進作用。ＴＨ蛋白與二價離子有特別高的親和力，Ｃａ２＋和Ｍｇ２＋可以促使其聚合，破除ＴＨ蛋白的抑制作用（范杰，１９９０）。動物Ｃａ的排泄主要通過糞便進行，通過尿液排泄較少，而尿液是Ｍｇ主要的排泄途徑之一（Ｍｃｄｏｗｅｌｌ，１９９２）。所以，尿中的鎂離子含量對ＴＨ蛋白有重要的調(diào)節(jié)作用。當尿鎂含量較高時，可以破除ＴＨ蛋白這一結(jié)石抑制因子的作用，促進結(jié)石的形成。這也進一步說明，高鎂日糧可能對結(jié)石的形成起到促進作用。從營養(yǎng)的角度來分析，肉牛日糧的精粗比過高、高鈣高鎂日糧和飼料鈣磷比失衡是腎結(jié)石形成的主要營養(yǎng)學誘因；同時高鎂日糧對肉牛的結(jié)石形成也可能存在著一定的促進作用。